精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號(hào)、廠家差異不盡相同,操作人員上崗前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn),了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等,使用前必須仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。一般儀器都會(huì)經(jīng)歷如下操作步驟[1]:開機(jī)接通電源,打開計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴,滴入精子計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中,置顯微鏡操作平臺(tái)上,點(diǎn)擊“活動(dòng)顯示”菜單,調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距,顯示器上即可顯示待測(cè)標(biāo)本的精子運(yùn)動(dòng)圖像。3.分析點(diǎn)擊“計(jì)算分析”菜單,系統(tǒng)進(jìn)入自動(dòng)分析狀態(tài),圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析。4.打印報(bào)告分析結(jié)束后,可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),直線性(LIN)?:曲線軌跡的直線性。北京計(jì)數(shù)精子分析W.H.O 5
五、精子活動(dòng)力檢測(cè)[正常參考值]**后30-60分鐘活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子>0.80:**后120分鐘內(nèi)活動(dòng)力為Ⅲ級(jí)以上的精子>0.60;**120分鐘后0.25-0.60的精子仍能活動(dòng)。[臨床意義]活動(dòng)不良或不活動(dòng)的精子增多,是導(dǎo)致不育的重要原因之一。常見(jiàn)于精索靜脈曲張、泌尿生殖系的非特異性***如大腸桿菌***,某些代謝藥、抗瘧藥、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活動(dòng)力下降。六、精子計(jì)數(shù)[正常參考值](100-150)×109/L或一次排精總數(shù)為(4-6)×108。[臨床意義]1.精子計(jì)數(shù)小于20×109/L或一次排精總數(shù)少于1×108為不正常,見(jiàn)于精索靜脈曲張、鉛金屬等有害工業(yè)污染、大劑量放射線及某些藥物影響。2.精液多次未查到精子為無(wú)精癥,主要見(jiàn)于睪丸生精功能低下,先天性輸精管、精囊缺陷或輸精管阻塞。輸精管結(jié)扎術(shù)2個(gè)月后精液中應(yīng)無(wú)精子,否則說(shuō)明手術(shù)失敗。3.老年人從50歲開始精子數(shù)減少以至逐步消失。南京瀕危物種精子分析高準(zhǔn)確率CASA系統(tǒng)用量少,檢測(cè)速度快,能夠顯著提高實(shí)驗(yàn)室的工作效率。
通過(guò)結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較,其結(jié)果為:采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動(dòng)精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來(lái)源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來(lái)考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精I(xiàn)VF)的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。
精液顯微鏡檢查精子計(jì)數(shù):正常人精子計(jì)數(shù)為0.6×1012~1.5×0.012/L,相當(dāng)于一次排出的精子總數(shù)為400×106~600×106。當(dāng)精子計(jì)數(shù)值<20×106/ml或一次排精總數(shù)<100×106為精子減少,超過(guò)致孕極限而導(dǎo)致不育。精液直接涂片或離心沉淀后均未查到精子為無(wú)精癥。見(jiàn)于先天性睪丸發(fā)育不全、畸形或后天睪丸損傷和萎縮(如睪丸結(jié)核、炎癥、淋病、垂體或腎上腺功能異常的內(nèi)分泌性疾病等)、輸精管阻塞或是先天性輸精管及精囊缺陷,是導(dǎo)致少精或無(wú)精的重要原因,也是導(dǎo)致不育的重要原因。檢查有無(wú)精子也是檢查輸精管結(jié)扎術(shù)的效果觀察。結(jié)扎六周后,連續(xù)檢查無(wú)精子,說(shuō)明手術(shù)成功,如果結(jié)扎兩個(gè)月后,精液中仍有精子,說(shuō)明手術(shù)不成功。精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較,具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測(cè)依據(jù)。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會(huì)影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、過(guò)短對(duì)**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無(wú)毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時(shí)間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時(shí)間的延長(zhǎng),精子活動(dòng)力及活動(dòng)率有減少的趨勢(shì)。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測(cè)精子活動(dòng)力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會(huì)增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡(jiǎn)單易懂,用戶無(wú)需具備專業(yè)知識(shí)也能夠輕松上手使用。計(jì)數(shù)精子分析W.H.O 6
全自動(dòng)精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢(shì)。北京計(jì)數(shù)精子分析W.H.O 5
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來(lái)定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。與人工操作相比,自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒(méi)有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。北京計(jì)數(shù)精子分析W.H.O 5