武漢透明帶穿孔壓電胚胎干細胞

壓電式破膜儀的原理壓電式破膜儀的原理基于壓電效應。當壓電陶瓷通電后，它會產(chǎn)生高頻振動。這種振動被傳遞到顯微操作針上，使針產(chǎn)生振動。這種振動用于在顯微操作過程中打孔或穿孔細胞膜，特別是在哺乳動物胚胎透明帶細胞膜的穿孔任務中。壓電式破膜儀可以配合顯微操作臂和顯微注射儀使用，以提高克隆動物中核移植、小鼠ICSI等工作的成功率。由于壓電脈沖能直接無損失地傳輸?shù)讲僮麽樕希沟眉毎さ拇┛赘泳_和可靠。這種顯微操作方式提高了多種實驗的成功率，包括胚胎干細胞或誘導多能干細胞的寒胚移植、小鼠ICSI等。此外，壓電式破膜儀操作直觀、簡單快捷，具有可重復性的參數(shù)設置，實驗參數(shù)可記憶，也可以選用人體工程學腳踏或儀器上的旋鈕進行操作。PRIME TECH 公司生產(chǎn)的PMM 150FU為全世界較早的壓電破膜儀。武漢透明帶穿孔壓電胚胎干細胞

傳統(tǒng)的ICSI是通過授精針刺破卵子，將挑選好的精子注入使之受精。本質上對卵子來說是一種物理性侵入，特別對于幼弱老化的卵子可能會有一定損傷的風險。而全新的壓電式胞漿內(nèi)單精子注射（Piezo-ICSI）技術，可以減少對卵子的傷害，相較于常規(guī)式的ICSI相比更能提高受精率。Piezo-ICSI超音振動顯微受精法，采用極細（0.908毫米）的平口注射針，比常規(guī)的注射針（1.473mm）細小了將近一半，能夠將卵巢的傷害降到比較低。另一方面，精子注射的過程對卵子的影響也極其重要。Piezo-ICSI技術通過超音振動來打開卵子透明帶再將精子注入，減少了對卵子的損傷，也能夠提高胚胎成功受精的幾率。研究數(shù)據(jù)顯示，以原有的人工授精療法ICSI與Piezo-ICSI進行比較，受精率從83.1%提高到90.3%，細胞分裂優(yōu)化由84.60%提高到88.10%。深圳壓電PMM 6DPMM通過將精子尾部與頭部割離,精子頭部吸入平口,在中低檔能量下即可穿透透明帶,進行單精子顯微注射。

注射—將含一個已制動精子的注射管輕柔刺破透明帶和卵膜，進入卵母細胞中心。注入精子時，應盡可能少地帶入培養(yǎng)液。之后使用負壓破壞卵膜，隨后輕柔抽吸細胞質。精子置入、穿過卵膜和抽吸細胞質以***卵母細胞的不同方法對受精和胚胎發(fā)育率的影響是一個研究熱點。壓電輔助的ICSI是一種新型方法，目前已在有ICSI結局不良病史和MⅡ期卵母細胞有限的患者中使用。在ICSI操作過程中，該技術對卵母細胞的損傷較小且可改善受精率和胚胎質量。目前使用壓電驅動管的新型ICSI注射技術已成功用于多種哺乳動物。由于該注射器采用超聲切割力(而不是刺穿力)穿透卵膜，注射過程中卵母細胞幾乎沒有變形，因此其對卵母細胞的損傷大幅減少。該技術實現(xiàn)的存活率和成功率同樣高。注射后，根據(jù)標準實驗室方案培養(yǎng)卵母細胞。受精ICSI后，受精率為50%-80%。雖然ICSI不可保證一定受精，但完全受精失敗的發(fā)生率較低，通常發(fā)生于獲卵數(shù)較低的周期。受精失敗的原因通常不是未置入精子或卵母細胞排出精子。其可能是由于卵母細胞***失敗，這通常與卵母細胞質量較差或精子無活性有關。

**近幾年來，Piezo-ICSI法（壓電顯微受精法）被高度重視。使用了Piezo-ICSI法，與常規(guī)的顯微受精技術相比，對卵子的損害更小。結果顯示，用Piezo法會提高受精率，之后受精卵的發(fā)育也更好。Piezo-ICSI壓電顯微受精方法，與傳統(tǒng)ICSI顯微受精方式不同，采用平口而不是尖口的精子注射針，通過超音振動技術打開卵子透明帶再將精子注入卵子，從而一定程度上減少了注射過程對卵子產(chǎn)生的損害，使高齡女性胚胎養(yǎng)囊率有所提升。臨床數(shù)據(jù)顯示，特別是針對一些大齡及反復受精失敗的情況，Piezo-ICSI比常規(guī)ICSI方法的受精率從66.4%提高到79.4%，受精以后的退化率（即停止分裂）從18.6%降低到11.9%。而妊娠率從14.9%提高到23.1%。操作穩(wěn)定性更強事實上相較Piezo法，常規(guī)的顯微受精方法從穩(wěn)定性上更難操作。用汽車來舉例的話，Piezo法相當于自動檔汽車，常規(guī)的顯微受精方法相當于手動檔汽車，Piezo法可以縮短培養(yǎng)師的培訓時間。日本只有10家能做Piezo即使在日本，采用Piezo法的醫(yī)院也不太多。在日本有600家進行體外受精、顯微受精的醫(yī)院，而采用Piezo法的醫(yī)院或許也就10家左右。從現(xiàn)在起Piezo法的優(yōu)勢會得以重新評估，或許10年，20年后會在世界各地得以普及。壓電顯微操作儀PMM 6可用于牛卵母細胞和胚胎的ICSI等實驗。

卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射（ICSI）不僅用于人類輔助生殖（ART），而且在稀有物種保護、轉基因動物的生殖系拯救或任何獸醫(yī)輔助受孕過程中也被***用于獸醫(yī)體外受精。壓電輔助ICSI于1995年***被描述，可用于標準ICSI失敗的動物（如小鼠）的輔助受孕。該技術所需的顯微注射工作站與標準ICSI非常相似，但在毛細管支架上增加了一個壓電沖擊單元。本用戶指南重點介紹壓電輔助顯微注射程序本身。摘要卵母細胞胞漿內(nèi)單精子顯微注射，即將單個精子直接注射到卵子的細胞質中，***在倉鼠身上被描述，并已成功應用于人類，以及其他物種，如小鼠。在動物模型中進行的ICSI是研究直接受精過程以及不孕原因的比較好工具。特別是在生物醫(yī)學研究領域，當精子被共同注射或包裹外源DNA時，ICSI也可以用作基因轉移技術。此外，當轉基因表達或突變損害雄性或雌性小鼠的生存能力或生育能力時，通常會應用小鼠ICSI。在這些情況下，壓電輔助ICSI可以成為拯救和維持非常有價值的小鼠品系的一種手段，因為正常的ICSI已被證明在小鼠身上很困難。幾項研究表明，通過壓電驅動的微毛細管注**子對小鼠卵子的創(chuàng)傷遠小于傳統(tǒng)方法。此外，壓電輔助ICSI已被證明可以顯著提高受精成功率。壓電破膜儀 PMM 的推廣和應用不僅可以提高生殖醫(yī)學領域的科研水平，還能夠為更多不孕不育的夫婦帶來希望。深圳壓電PMM 6D

壓電輔助ICSI于1995年被描述，可用于標準ICSI失敗的動物（如小鼠）的輔助受孕。武漢透明帶穿孔壓電胚胎干細胞

“ICSI”（intracytoplasmicsperminjection）指卵胞漿單精子注射，其操作主要涉及“精子制動-精子拾取-破膜-注射”幾個步驟，其中在“破膜”（即使用注射針刺破卵膜，以便將單個精子送入卵胞漿）這一步，部分患者的卵子會出現(xiàn)“無破膜感”這一特征，這是怎么回事呢？原來，進行ICSI操作的時候，并不是直接用注射針徑直扎破卵膜。技術書籍這樣描述道：“調節(jié)顯微操作作針和卵膜至同一水平面，將注射針中的精子推至針尖處，注射針從卵子3點鐘位置穿入透明帶并繼續(xù)進針，至卵中心或越過中心位置。由于卵膜的彈性，進針處卵膜出現(xiàn)‘漏斗狀’，但卵膜仍未破裂，需輕微回吸注射針以確認膜破裂。一旦刺破卵膜可見到胞漿和精子的一個‘快速反流’的過程或可見卵膜‘回彈’現(xiàn)象，之后將精子注入卵子胞質內(nèi)。這是正常情況下的破膜操作，而文章開頭提到的“無破膜感”，則是指注射針穿入透明帶的同時也立即穿透卵膜，不形成漏斗狀結構，看不到胞漿的快速返流或回彈現(xiàn)象。學術界給具有這一特征的卵子細胞膜起了個特有名稱——脆性卵膜。武漢透明帶穿孔壓電胚胎干細胞