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精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應(yīng)計(jì)10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應(yīng)計(jì)數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml該設(shè)備的設(shè)計(jì)緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室使用。廣州計(jì)算機(jī)輔助精子分析負(fù)相差
精液常規(guī)是精液常規(guī)檢查的簡稱;是泌尿外科、男科、生殖科簡便普及的化驗(yàn)室檢查方法之一。也是婦科經(jīng)常參考使用的重要參數(shù)之一。精液由精子和精漿組成,其中精子占10%,其余為精漿。它除了含有水、果糖、蛋白質(zhì)和脂肪外,還含有多種酶類和無機(jī)鹽。精液中含有鋅元素。精子精液是由睪丸產(chǎn)生的。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產(chǎn)生。精漿里含有果糖和蛋白質(zhì),是精子的營養(yǎng)物質(zhì)。另外,精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質(zhì)。正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無色,每毫升為精液中的精子數(shù)一般在6千萬至2億個。有活動能力的精子占總數(shù)的60%以上。畸形精子應(yīng)總數(shù)的10%以下。在室溫下精子活動力持續(xù)3-4小時(shí)。精液是堿性,女性生殖器內(nèi)部則為酸性。因此,精液進(jìn)入女性內(nèi)部,就會被中和。綿羊精子分析WOB全自動精子分析儀極大提高臨床檢驗(yàn)水平,廣泛應(yīng)用于泌尿科,男性科以及計(jì)劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等。
采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對生精功能有影響的藥物等。采取精液時(shí)間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈。可采用**法或電動按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開頭部分來自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來自精囊,故應(yīng)收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開頭部分。正因?yàn)橐讈G失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈、無菌、干燥,采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同;瓶子不應(yīng)過大,但瓶口不應(yīng)過小,以免將精液射出瓶外;還應(yīng)貼上標(biāo)簽,記錄姓名及取精時(shí)間。在冷天應(yīng)將精液標(biāo)本保溫,放置在貼身內(nèi)衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。
精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,通過顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡,客觀記錄了精子的密度、活動力、活動率和存活率等各項(xiàng)參數(shù)。計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng)、恒溫系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外,儀器一般配有**樣品盒,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成??梢詫?biāo)本信號通過顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,其功能是對CCD信號進(jìn)行抓拍、識別、預(yù)處理后,將成熟信號輸送到計(jì)算機(jī)。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成。加溫是通過熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi),提供穩(wěn)定、可靠的檢查環(huán)境。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng):對圖像信號進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理,對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識別技術(shù)和圖像處理技術(shù),對精子的動靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析,對精子的密度、活力、活率、運(yùn)動軌跡等特征進(jìn)行量的檢測分析?精子分析可以分析參數(shù)有,曲線速率(VCL)?:精子頭沿其實(shí)際曲線運(yùn)動的時(shí)均速率。
檢查具備條件受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí));[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,以**方式獲取精液,一次全部射入容器,蓋上蓋,記錄標(biāo)本離體時(shí)間;貼身保溫,30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室,并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽踊顒忧闆r,精子密度(個/毫升),精液液化時(shí)間(標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間),不動精子(個/高倍視野)等。見不動精子,須染色方可區(qū)分:不活動的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn),仍然找不到精子;方可報(bào)告無精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn),結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。Hamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報(bào)告生成功能,能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。慢速運(yùn)動精子分析LIN
Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優(yōu)點(diǎn)。廣州計(jì)算機(jī)輔助精子分析負(fù)相差
美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)室所使用。本試驗(yàn)研究目的對精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在大鼠附睪精子計(jì)數(shù)結(jié)果的比較驗(yàn)證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計(jì)數(shù)進(jìn)行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實(shí)施安樂死后,取左側(cè)附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預(yù)熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進(jìn)行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進(jìn)行精子計(jì)數(shù),同時(shí)吸取稀釋后的精子懸液滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi),通過光學(xué)顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù),比較兩種計(jì)數(shù)方法的差異性。結(jié)果***批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的精子計(jì)數(shù)結(jié)果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精子計(jì)數(shù)結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。結(jié)論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學(xué)研究中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。廣州計(jì)算機(jī)輔助精子分析負(fù)相差