紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時(shí),**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí),通常認(rèn)為,卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處,然后在3點(diǎn)處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng),或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過(guò)紡錘體觀測(cè)儀,可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位,從而避免在ICSI過(guò)程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道,在進(jìn)行ICSI時(shí),觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。紡錘體的研究對(duì)于理解遺傳信息的傳遞和維持具有重要意義。上海成熟卵母細(xì)胞紡錘體胚胎發(fā)育
核移植,又稱體細(xì)胞核移植,是一種將體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中的技術(shù)。這一技術(shù)的關(guān)鍵在于確保移植后的細(xì)胞核能夠在卵母細(xì)胞內(nèi)重新編程,恢復(fù)全能性,并引導(dǎo)后續(xù)的胚胎發(fā)育。自1996年克隆羊“多莉”誕生以來(lái),核移植技術(shù)便引起了全球范圍內(nèi)的關(guān)注與研究熱潮。紡錘體是卵母細(xì)胞在減數(shù)分裂過(guò)程中形成的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)精確分離染色體,確保遺傳信息的正確傳遞。然而,紡錘體對(duì)外部環(huán)境極為敏感,容易受到冷凍過(guò)程中溫度波動(dòng)、滲透壓變化及冷凍保護(hù)劑毒性等因素的影響而發(fā)生損傷。因此,紡錘體卵冷凍技術(shù)的成功與否,直接關(guān)系到核移植后胚胎的發(fā)育潛力和質(zhì)量。成熟卵母細(xì)胞紡錘體胚胎發(fā)育顯微鏡下的紡錘體,如同精密的分子機(jī)器,引導(dǎo)染色體分離。
紡錘體是如何形成的(2)動(dòng)粒微管連接染色體動(dòng)粒與位于兩極的中心體。在有絲分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反兩個(gè)方向的中心體伸出的動(dòng)粒微管就會(huì)隨機(jī)地與染色體上的動(dòng)粒結(jié)合而俘獲染色體,微管**終附著在動(dòng)粒上,動(dòng)粒微管把染色體和紡錘體連接在一起。在細(xì)胞分裂期的后期,分開后的染色單體被拉向兩極。染色體移動(dòng)由兩個(gè)相互獨(dú)立且同步進(jìn)行的過(guò)程所介導(dǎo),分別為過(guò)程A和過(guò)程B。在過(guò)程A中,在連接微管和動(dòng)粒的馬達(dá)蛋白的作用下,動(dòng)粒微管解聚縮短,在動(dòng)粒處產(chǎn)生的拉力使染色體移向兩極。極間微管是從一個(gè)中心體伸出的某些微管與從另一個(gè)中心體伸出的微管相互作用,阻止了它們的解聚,從而使微管結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定,兩套微管的這種結(jié)合形成了有絲分裂紡錘體的基本框架,具有典型的兩極形態(tài),產(chǎn)生這些微管的兩個(gè)中心體稱為紡錘極,這些相互作用的微管被稱為極間微管。在有絲分裂后期過(guò)程B中,極間微管的伸長(zhǎng)和相互間的滑行使紡錘極向兩極方向移動(dòng)。星體微管從中心體向周圍呈輻射狀分布,在有絲分裂后期過(guò)程B中,每一紡錘極上向外伸展的星體微管發(fā)出向外的力,拉動(dòng)兩個(gè)紡錘極向兩極方向移動(dòng)。
無(wú)需染色紡錘體觀察技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)冷凍過(guò)程中紡錘體的形態(tài)變化,從而準(zhǔn)確評(píng)估冷凍保存的效果。通過(guò)對(duì)比冷凍前后紡錘體的形態(tài)和穩(wěn)定性,研究者可以優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方和濃度,以及改進(jìn)冷凍程序,減少冷凍損傷,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。解凍后的卵母細(xì)胞在無(wú)需染色的情況下,可以直接通過(guò)Polscope系統(tǒng)進(jìn)行紡錘體觀察。這一技術(shù)能夠迅速評(píng)估解凍后卵母細(xì)胞的質(zhì)量,包括紡錘體的形態(tài)、位置、穩(wěn)定性等關(guān)鍵指標(biāo),為后續(xù)的受精和胚胎發(fā)育提供重要參考。紡錘體的形成和功能受到多種信號(hào)分子的調(diào)控,如生長(zhǎng)因子等。
微管蛋白的突變會(huì)影響微管的聚合和解聚,導(dǎo)致紡錘體結(jié)構(gòu)異常。例如,某些疾病中,微管蛋白的突變會(huì)導(dǎo)致紡錘體功能障礙,增加染色體非整倍性的風(fēng)險(xiǎn)。動(dòng)粒與微管結(jié)合能力下降:動(dòng)粒是染色體與紡錘體微管連接的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),其功能障礙會(huì)影響染色體的正確捕捉和分離。例如,某些基因突變(如BUBR1突變)會(huì)影響動(dòng)粒的功能,導(dǎo)致染色體分離錯(cuò)誤。動(dòng)粒通過(guò)信號(hào)傳導(dǎo)途徑與紡錘體檢查點(diǎn)相互作用,確保染色體的正確分離。動(dòng)粒信號(hào)傳導(dǎo)異常會(huì)導(dǎo)致紡錘體檢查點(diǎn)失效,增加染色體非整倍性的風(fēng)險(xiǎn)。 紡錘體在細(xì)胞分裂后期通過(guò)收縮力推動(dòng)染色體分離。昆明雙折射性紡錘體廠家
紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化揭示了細(xì)胞分裂過(guò)程中分子層面的奧秘。上海成熟卵母細(xì)胞紡錘體胚胎發(fā)育
紡錘體的雙極化是卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過(guò)程中的關(guān)鍵事件之一。近年來(lái),我國(guó)學(xué)者在人類卵母細(xì)胞紡錘體雙極化機(jī)制研究方面取得了重要進(jìn)展。通過(guò)高分辨成像技術(shù),研究者們揭示了人類卵母細(xì)胞紡錘體雙極化的獨(dú)特機(jī)制,并發(fā)現(xiàn)了調(diào)控此過(guò)程的關(guān)鍵蛋白。這些研究成果不僅為雙折射性紡錘體卵冷凍研究提供了新的視角和思路,也為臨床生殖障礙疾病的診療提供了科學(xué)依據(jù)。隨著偏光成像技術(shù)和冷凍保護(hù)劑研究的不斷深入,未來(lái)有望開發(fā)出更加高效、安全的卵母細(xì)胞冷凍保存方案。例如,通過(guò)改進(jìn)冷凍速率和程序、優(yōu)化保護(hù)劑配方等手段,進(jìn)一步減輕冷凍損傷,提高解凍后卵母細(xì)胞的存活率和發(fā)育潛能。上海成熟卵母細(xì)胞紡錘體胚胎發(fā)育