深圳Hamilton Thorne紡錘體觀測儀

秋水仙素會使動物細胞染色體加倍嗎微管蛋白按照來源可分為植物微管蛋白和動物腦蛋白。因植物微管蛋白難以制備，秋水仙堿與動物腦微管蛋白結(jié)合反應(yīng)研究得要更多一些。秋水仙堿是從植物秋水仙中提純出的一種生物堿，又名秋水仙素，構(gòu)成微管的α、β微管蛋白異源二聚體是秋水仙素分子的結(jié)合靶點。當(dāng)秋水仙堿與正在進行有絲分裂的細胞接觸時，秋水仙堿結(jié)合到微管蛋白的特定位點，導(dǎo)致α微管蛋白與β微管蛋白二聚體結(jié)構(gòu)變形，從而阻斷微管蛋白組裝成微管，但并不影響微管蛋白的解聚，所以紡錘體會迅速消失。

秋水仙堿的濃度和作用時間對動、植物細胞染色體加倍的影響是關(guān)鍵。有研究結(jié)果表明，在花粉母細胞減數(shù)分裂細線期與粗線期進行美洲黑楊2n花粉的誘導(dǎo)效果比較好，總體上在減數(shù)分裂粗線期進行誘導(dǎo)得到的2n花粉**多，并且誘導(dǎo)的比較好濃度為0.5%。劉愛生等在利用人類外周血淋巴細胞進行染色體G顯帶制作中，在阻斷培養(yǎng)的4h內(nèi)任意時間加入相應(yīng)劑量的秋水仙素，能獲得用于G顯帶的形態(tài)完好、大小適中、分散均勻、輪廓清楚的中期染色體標(biāo)本相。陳長超等利用秋水仙堿處理MⅠ期卵母細胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Ml期紡錘體發(fā)生解聚，染色體周圍紡錘體微管全部消失或部分殘留，染色體排列異常。 研究紡錘體有助于理解細胞分裂的分子機制。深圳Hamilton Thorne紡錘體觀測儀

紡錘體功能分解

      在細胞分裂中，其主要作用有兩個部分。其一為排列與分裂染色體。紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。紡錘體的正常生成是染色體排列的必要條件。紡錘體生成完畢后一般會有5-20分鐘的延遲，以供細胞調(diào)整著絲點上微管束的極性，以及決定是否所有的著絲點都附著正確。此后細胞進入分裂后期，染色體分裂為兩組數(shù)目相等的姐妹染色單體。同樣，紡錘體的完整性決定這個分裂過程在時間和空間上的準(zhǔn)確性。

      紡錘體另一功能為決定胞質(zhì)分裂的分裂面。染色體分裂的同時，紡錘體中的一部分微管不隨染色體分裂到兩極，而停弛在紡錘體**， 形成紡錘**體(central spindle)。在紡錘中體的**為兩組極性相反的微管交疊的區(qū)域，稱為紡錘**區(qū)(spindle midzone).此**區(qū)就是接下來的胞質(zhì)分裂面。胞質(zhì)分裂開始于分裂后期的較晚期。胞質(zhì)分裂一般結(jié)束于分裂末期后1-2小時，此期間兩個子細胞由中心顆粒體(midbody)連接。 一般認為紡錘體的分解發(fā)生在細胞分裂末期。 昆明克隆紡錘體液晶偏光補償器紡錘體在減數(shù)分裂中也發(fā)揮重要作用，確保生殖細胞染色體正確分離。

在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，卵母細胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點之一。尤其是針對卵母細胞內(nèi)部高度復(fù)雜且精細的紡錘體結(jié)構(gòu)，其冷凍過程中的穩(wěn)定性與完整性直接關(guān)系到解凍后卵母細胞的存活率及發(fā)育潛能。紡錘體作為卵母細胞內(nèi)部的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成，具有雙折射性。這種特性使得紡錘體在偏振光下能夠呈現(xiàn)出獨特的形態(tài)和特征，從而被Polscope等偏振光顯微鏡捕捉并觀察。雙折射性紡錘體的形態(tài)、穩(wěn)定性和完整性對于卵母細胞的正常減數(shù)分裂及胚胎發(fā)育至關(guān)重要。

在生殖醫(yī)學(xué)與輔助生殖技術(shù)的快速發(fā)展中，卵母細胞的冷凍保存技術(shù)顯得尤為重要。然而，卵母細胞，尤其是其內(nèi)部的紡錘體結(jié)構(gòu)，對低溫環(huán)境極為敏感，冷凍過程中的損傷往往影響解凍后卵母細胞的存活率及發(fā)育潛能。偏光成像技術(shù)，特別是Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng)，結(jié)合了液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術(shù)，能夠捕捉到具有雙折性特征的細胞結(jié)構(gòu)，如紡錘體。紡錘體由微管等高分子物質(zhì)有序排列而成，這些物質(zhì)能夠使偏振光發(fā)生折射現(xiàn)象，從而被檢偏器捕捉并通過偏振光顯微鏡觀察。這一技術(shù)無需對細胞進行固定和染色，能夠動態(tài)評估卵母細胞的質(zhì)量與紡錘體的相關(guān)性，為卵母細胞冷凍保存的研究提供了新的手段。紡錘體由微管組成，其動態(tài)變化調(diào)控著細胞分裂的進程。

盡管成熟卵母細胞紡錘體冷凍保存技術(shù)取得了進展，但仍面臨一些挑戰(zhàn)。首先，冷凍損傷仍然是制約其臨床應(yīng)用的主要問題之一。盡管玻璃化冷凍法能夠在一定程度上減少冷凍損傷，但仍無法完全避免。其次，冷凍保存后的卵母細胞在體外受精和胚胎發(fā)育過程中的表現(xiàn)仍存在不確定性。這可能與冷凍過程中紡錘體和染色體的損傷有關(guān)，也可能與冷凍保護劑的殘留毒性有關(guān)。此外，法律倫理問題也是卵母細胞冷凍保存技術(shù)面臨的一大挑戰(zhàn)。不同國家和地區(qū)對卵母細胞冷凍保存的法律和倫理規(guī)定各不相同，這在一定程度上限制了該技術(shù)的普及和應(yīng)用。紡錘體在細胞分裂末期逐漸解體，為細胞質(zhì)分裂做準(zhǔn)備。昆明偏光成像紡錘體觀測儀

紡錘體在細胞分裂過程中經(jīng)歷明顯的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化。深圳Hamilton Thorne紡錘體觀測儀

為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷，研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細胞骨架保護劑，如紫杉醇（Taxol）。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu)，防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù)，研究者可以實時監(jiān)測紫杉醇對紡錘體的保護效果，評估其在冷凍保存過程中的作用機制。此外，還可以進一步觀察解凍后卵母細胞的發(fā)育潛能，為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無需對細胞進行固定和染色，保持細胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r監(jiān)測紡錘體的形態(tài)變化，評估冷凍效果。能夠捕捉到細微的紡錘體形態(tài)變化，提高評估的準(zhǔn)確性。深圳Hamilton Thorne紡錘體觀測儀