為什么要熱滅活丨血清?加熱可以滅活補體系統。煥活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細胞和巨噬細胞,在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活丨血清。有必要做熱滅活嗎?實驗顯示,經過正確處理的熱滅活丨血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。云海生物致力于為客戶提供優(yōu)良的產品和專業(yè)的服務,我們的專業(yè)團隊將竭誠為您解答疑問。四川羊血清廠家
血清的使用1、血清的熱滅活:進行熱滅活的目的是,利用較高的溫度使補體失活。由于胎牛血清會嚴格控制采集血時間為5-8月齡的胎牛,此時還未形成完整的補體系統,因此,合格的胎牛血清,是不需要滅活的。但是實驗中如果需要新生牛血清、小牛血清、豬血清或馬血清這些血清時,則需要根據實驗要求而定。根據血清廠家多年來總結的經驗,常規(guī)解凍后,40℃水浴加熱20分鐘即可,能夠盡可能地保留營養(yǎng)成分。2、細胞培養(yǎng)的應用:對于新的細胞系或從無血清培養(yǎng)轉變到胎牛血清培養(yǎng)的細胞系,需要進行適應期。在初始適應期,可以將血清濃度逐漸降低,直到細胞適應無血清培養(yǎng)為止。3、關注血清的批次:相同品牌的胎牛血清,在蛋白質含量等方面,可能會存在批次差異,因此在同一實驗中好使用來自同一批次的血清,以減少變異性。如果不得不使用不同批次的胎牛血清,請進行驗證實驗以確保結果的可重復性。海淀區(qū)羊血清培養(yǎng)基選擇云海生物的雞血清,就是選擇了高質量與穩(wěn)定性,為您的實驗提供可靠保障。
為什么要熱滅活的血清是否有必要做熱滅活?●熱滅活加熱可以滅活補體系統。煥活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,煥活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活胎牛血清?!袷欠裼斜匾鰺釡缁顚嶒烇@示,經過正確處理的熱滅活胎牛血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的胎牛血清對細胞的生長只有微小的促進,或完全沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了胎牛血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的胎牛血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是胎牛血清遭受污染,而把胎牛血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省您寶貴的時間,更確保胎牛血清的質量。
血清出現沉淀的問題:血清非人工產品,有些東西沉淀出來系自然現象;纖維蛋白原、鹽析出,如磷酸鈣等;膽固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情況下還會增加:熱滅活、37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)、反復凍融、熔化中沒有搖勻、gamma照射、長期存放在2-8°C。另外我們還發(fā)現:血清加入到RPMI1640中時,沉淀往往會發(fā)生或增加:pH升高時,沉淀會增加;在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因為培養(yǎng)基的蒸發(fā)也會導致沉淀的增加。如何避免血清中產生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的產生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質;(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。云海生物提供的馬血清,源自健康馬匹,保證純凈無污染,為您的研究提供可靠支持。
胎牛血清功能及作用牛血清是細胞培養(yǎng)中用量很大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必需的營養(yǎng)成分,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。血清,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用:1.血清提供:營養(yǎng)和能量來源;生長和粘附因子,肽和類固醇;載體蛋白。2.保護細胞:免受蛋白酶、毒性物質、PH值波動、機械剪切力、氧化及自由基的損傷。云海生物的雞血清,源自健康雞只,經過嚴格篩選與提取,保證每一滴都純凈無比。湖南雞血清生產廠家
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兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清[2]。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現,高質量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)[3][4]。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定,精選內更低批次(≤3EU/ml),原裝進口。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩(wěn)定供應品牌。新批次在試用前,提供試用服務,養(yǎng)細胞更放心。每個批次產量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優(yōu)先鎖定,保證大多數項目兩年不需換批次,細胞試驗數據穩(wěn)定。每年按廠家生產順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩(wěn)定。為Ausbian血清用戶提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持。(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多延伸性技術幫助。)針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。為Ausbian血清提供代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發(fā)貨。四川羊血清廠家