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2.取血方式不同胎牛血清:母牛懷孕3-8個月時,采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清:分別是取自新生牛(小牛)、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分比較少;促細胞生長因子、促附因子、及其他活性物質等組分也不同于其他幾類血清4.用途不同某些細胞的培養(yǎng)必須使用胎牛血清才行,如:干細胞、淋巴細胞、神經細胞、星狀膠質細胞等;而有些細胞需要小牛血清就可以,如:腫瘤細胞等。使用濃度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的濃度在20%血清的保質期是5年,儲存溫度-10 ~ -30℃。黑龍江馬血清
瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清.血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質量.鄭州胎牛血清供應商細胞培養(yǎng)時,要保證細胞可以順利生長和增殖,需添加10%~20%的血清,動物血清還可起到酸堿度緩沖液的作用。
1989年左右,也有國外學者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現(xiàn),質量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定
按物種分類馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應答, 常與牛血清結合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。豬血清豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng), 疫苗生產(生產支原體), 中和脂質體包裹的腺相關病毒(AAV), 用于誘導大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中的標準陰性參考。兔血清正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學和免疫細胞化學方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。碳水化合物,脂肪,生長因子,礦物質及微量元素。
去外泌體血清去除≥99%的胎牛血清內源外泌體,并與處理前的胎牛血清具有相同的細胞生長速率和形態(tài)。適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標定特定成分進行研究的實驗中。碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質,如某些、細胞因子、生長因子等,去除作用對分子量大小并無區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗證的作用效果。低IgG血清用于研究抗體、病毒和病毒反應、細胞表面抗原表位。四環(huán)素調控胎牛血清應用于使用敏感四環(huán)素誘導表達系統(tǒng)的細胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對四環(huán)素敏感的實驗中。在豬場生產中,對于血清學檢測結果進行正確地分析,有助于獲取有效的豬群信息。南通牛血清采購平臺
血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時造成的剪切力。黑龍江馬血清
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題,主要是:一、血清的成份可能有幾百種之多,目前對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認識,這給研究工作帶來許多困難;二、血清都是批量生產,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制;三、不能排除血清中含有易變物質,這被認為是“瓶中惡化”的原因之一。黑龍江馬血清
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