江西免疫組化怎么樣

來源: 發(fā)布時間:2025-04-06

免疫組化的局限性。靈敏度高、精確性和特異性是一種理想的cancer標記物必須具有的,但至今所發(fā)現(xiàn)的cancer標記物還沒有能完全滿足這些標準。某些正常細胞也分泌一些cancer標記物,因此cancer細胞學并不是單獨產(chǎn)生一種標記物,即選用一組抗體比單一抗體更有利。在cancer診斷中評估免疫組化的局限性主要在抗體特異性和解釋方面。在免疫組化操作中都必須有適當?shù)年栃耘c陰性對照,作為技術完整性質(zhì)量控制,如對照組被忽略或不理想時,免疫組化染色的結果要謹慎對待,免疫組化的正確結果不僅要依靠技術步驟上規(guī)范化操作,而且有賴于正確的解釋,在報告免疫組化染色結果時不應孤立地解釋,應考慮到診斷與鑒別診斷、所應用的抗體特性、所研究組織性質(zhì),同時還要注意假陽性與假陰性結果的干擾。做免疫組化的目的是什么?江西免疫組化怎么樣

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病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應該就是“做個免疫組化吧”;不管是臨床醫(yī)師,還是患者,他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化?”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進行細胞的識別。這一做法的依據(jù)是特定細胞和組織中的成分不同、則化學性質(zhì)不同,通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過,由于組織固定或儲存等,會造成相應物質(zhì)的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的應用。隨著免疫學研究的進展,根據(jù)抗原與相應抗體間特異性結合的性質(zhì),則有了現(xiàn)在免疫組化的方法:不同細胞、不同組織中抗原有一定差異,抗體與被測組織中的特定抗原結合,進而通過一定顯色方法將結合的抗體顯示出來。如有相應顯色,則證實可能有被測抗原;無顯色則可能無被測抗原。當然,這一方法中需注意相應的“例外”,如抗體的非特異性結合、非特異性顯色,則容易造成“假陽性”;或者雖有相關抗原、但所用抗體與該抗原并未結合等,則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應用經(jīng)驗的增加,這些問題在常規(guī)應用中盡量得以避免,前者如各種顯色方法的優(yōu)化;后者如抗原修復方法的優(yōu)化、新型抗體開發(fā)及選擇。江西免疫組化怎么樣英瀚斯生物,專業(yè)病理染色切片平臺,免疫組化效果好!

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免疫組化的特點:

1)特異性強。免疫學的基本原理決定抗原與抗體之間的結合具有高度特異性,因此,免疫組化從理論上講也是組織細胞中抗原的特定顯示,如角蛋白(keratin)顯示上皮成分,LCA顯示淋巴細胞成分。只有當組織細胞中存在交叉抗原時,才會出現(xiàn)交叉反應。

2)敏感性高。在應用免疫組化的起始階段,由于技術上的限制,只有直接法、間接法等敏感性不高的技術,那時的抗體只能稀釋幾倍、幾十倍;現(xiàn)在由于ABC法或SP三步法的出現(xiàn),使抗體稀釋上千倍、上萬倍甚至上億倍仍可在組織細胞中與抗原結合,這樣高敏感性的抗體抗原反應,使免疫組化方法越來越方便地應用于常規(guī)病理診斷工作。

3)定位準確、形態(tài)與功能相結合。該技術通過抗原抗體反應及呈色反應,可在組織和細胞中進行抗原的準確定位,因而可同時對不同抗原在同一組織或細胞中進行定位觀察,這樣就可以進行形態(tài)與功能相結合的研究,對病理學領域開展深入研究是十分有意義的。

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免疫組化的結果分析:

免疫組化實驗通常需要設置陽性對照、陰性對照(或替代對照)(陽性對照是排除方法和實驗系統(tǒng)有無問題;陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色)。一般情況下,陽性對照顏色的特點為:Ag定位,包漿、胞核、胞膜、間質(zhì)具有結構性。且染色的強度不同(顏色深淺不一);陰性對照的特點為:染色細胞與組織無區(qū)別,顏色具有彌散性,分布均勻。

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說明:免疫組化實驗可以對結果進行定量分析,但要實驗得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,要求背景染色淺且特異性染色較深,這樣分析的結果才會比較準確。 免疫組化常見問題原因分析!

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免疫組化的顯色系統(tǒng)

免疫組化的顯色系統(tǒng)是將抗原-抗體反應轉(zhuǎn)化為可見信號的關鍵步驟。常用的免疫組化顯色系統(tǒng)有DAB(3,3'-二氨基聯(lián)苯胺)和AEC(3-氨基-9-乙基咔唑)。DAB顯色產(chǎn)生棕色沉淀,適用于光學顯微鏡觀察。AEC顯色產(chǎn)生紅色沉淀,適用于光學顯微鏡觀察,但不適合長期保存。此外,還有熒光顯色系統(tǒng),如FITC(異硫氰酸熒光素)和TRITC(四甲基羅丹明異硫氰酸酯),適用于熒光顯微鏡觀察。選擇合適的顯色系統(tǒng)需要考慮實驗目的和檢測設備。 英瀚斯生物自有專業(yè)病理染色實驗室,可做免疫組化。陜西切片免疫組化推薦

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免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結合的原理來檢測組織切片中的抗原(如蛋白)。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體,而histo意味著組織。另一種類似的技術是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,簡稱ICC)。這兩個詞大家經(jīng)?;熘?,看著好像差不多,但實際上還是有點區(qū)別。IHCvsICC對于IHC,組織是來自患者或動物,經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片,封片后再處理。通過這種方法,研究人員可觀察細胞組分的定位,同時維持周圍組織的原先結構。對于ICC,大部分細胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除,只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液,來自患者或動物(如血涂片、拭子等),或在實驗室中進行的組織培養(yǎng)細胞系。 江西免疫組化怎么樣