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分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對(duì)應(yīng)于樣品吸收光譜中的某一個(gè)吸收峰的波長(zhǎng)。由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度,對(duì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度要求允許寬些。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。常見(jiàn)的紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍為190-1100 nm。中國(guó)澳門(mén)原子吸收分光分光光度計(jì)購(gòu)買(mǎi)
雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。寧夏原子吸收分光分光光度計(jì)購(gòu)買(mǎi)紫外分光光度計(jì)是測(cè)樣品中物質(zhì)吸收了光能量。
一些儀器具有多種光源供選擇:紫外光、可見(jiàn)光和甚至紅外光(780nm至3,000nm)。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分(大約380nm到800nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區(qū)域。分光光度計(jì)的帶寬(bandwidth)很大程度上依賴(lài)于單色儀的狹縫的寬度??梢酝渡涑鰧?shí)驗(yàn)精確要求的光譜。一種嚴(yán)格帶寬使得儀器能對(duì)復(fù)雜的混合物進(jìn)行高分辨率的吸光測(cè)量??勺兊膯紊珒x的狹縫寬度能使一臺(tái)分光光度計(jì)滿(mǎn)足多種實(shí)驗(yàn)需要。為了測(cè)量吸光值,分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二極管。
因此作為一名實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員,了解原子熒光光度計(jì)的使用以及簡(jiǎn)單維護(hù)是必要的。新一代原子熒光光度計(jì)使用步驟以及相關(guān)的注意事項(xiàng)。首先,在打開(kāi)原子熒光光度計(jì)的主機(jī)電源之前,要確定并安裝相應(yīng)的元素?zé)?;原子熒光光度?jì)/光譜儀使用前調(diào)節(jié)元素?zé)舨⑶掖蜷_(kāi)氬氣瓶主壓力閥,調(diào)節(jié)壓力閥使次級(jí)壓力閥輸出壓力~,調(diào)節(jié)載氣與輔氣流量;調(diào)節(jié)壓力然后再打開(kāi)原子熒光光度計(jì)預(yù)熱大約15到30分鐘;然后打開(kāi)進(jìn)入分析軟件,輸入相應(yīng)參數(shù)進(jìn)行檢測(cè);在測(cè)試結(jié)束后需要將進(jìn)樣管放入蒸餾水中沖洗反應(yīng)系統(tǒng),關(guān)閉氬氣瓶壓力閥,關(guān)閉蠕動(dòng)泵開(kāi)關(guān),松開(kāi)蠕動(dòng)泵泵卡;分光光度計(jì)的系統(tǒng)誤差和操作誤差對(duì)測(cè)量吸光度的影響是可以檢查和校正的。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。其工作原理為分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。本文介紹的是日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用方法。日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用1.開(kāi)電源,先開(kāi)U-3010電源,再啟動(dòng)電腦2.點(diǎn)擊桌面上UV,啟動(dòng)程序3.點(diǎn)擊method窗口,將會(huì)出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個(gè)對(duì)話框,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對(duì)話框;(2)Quantitation對(duì)話框,如果測(cè)波長(zhǎng)選擇wavelength,數(shù)量可選多個(gè),比如測(cè)定:260nm,280nm,230nm,則選擇3個(gè);如圖所示:(3)Instrument對(duì)話框,將你要測(cè)定的波長(zhǎng)值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,點(diǎn)確定鍵5.放入空白對(duì)照。雜散光是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)分析誤差的主要來(lái)源。青海分光光度計(jì)操作
超微量分光光度計(jì)不需要預(yù)熱,可隨時(shí)檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間短。中國(guó)澳門(mén)原子吸收分光分光光度計(jì)購(gòu)買(mǎi)
它還通過(guò)測(cè)定紫外光譜范圍內(nèi)強(qiáng)度峰值位置的精確度來(lái)確定波長(zhǎng)的系統(tǒng)及隨機(jī)誤差。遵照這些建議來(lái)維護(hù)分光光度計(jì),那么在今后的使用過(guò)程中再也不用擔(dān)心測(cè)量結(jié)果有問(wèn)題啦。分光光度法始于牛頓(Newton)。早在1665年牛頓作了一介罈人的實(shí)驗(yàn):他讓太陽(yáng)光透過(guò)暗室窗上的小圓孔,在室內(nèi)形成很細(xì)的太陽(yáng)光束,該光束經(jīng)棱鏡色散后,在墻壁上呈現(xiàn)紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫的色帶。這色帶就稱(chēng)為“光譜”。頓通過(guò)這個(gè)實(shí)驗(yàn);揭示了太陽(yáng)光是復(fù)合光的事實(shí)。中國(guó)澳門(mén)原子吸收分光分光光度計(jì)購(gòu)買(mǎi)