蘇州嘉安健達二代測序公司

什么是chip-seq？

Chip-seq即染色質(zhì)免疫共沉淀測序（ChromatinImmunoprecipitationSequencing），是一種結(jié)合染色質(zhì)免疫共沉淀（ChIP）技術(shù)與高通量測序（NGS）的分子生物學技術(shù)，可在全基因組范圍內(nèi)檢測與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等相互作用的DNA區(qū)段。以下是具體介紹：

技術(shù)原理

染色質(zhì)固定：使用甲醛等試劑交聯(lián)細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和DNA，使蛋白-DNA相互作用的復合物固定，從而保留它們在體內(nèi)的結(jié)合狀態(tài)。

染色質(zhì)片段化：采用超聲波或酶切的方法將染色質(zhì)剪切成適合測序的小片段，通常片段大小在200-500bp范圍內(nèi)。免疫共沉淀：利用特異性抗體富集與目標蛋白結(jié)合的DNA片段，通過抗體與目標蛋白的特異性結(jié)合，將蛋白-DNA復合物沉淀下來。

交聯(lián)逆轉(zhuǎn)與DNA提取：通過加熱或化學方法逆轉(zhuǎn)蛋白-DNA交聯(lián)，使DNA與蛋白質(zhì)分離，然后提取并純化DNA。

文庫構(gòu)建與高通量測序：對純化的DNA片段進行測序文庫制備，在DNA片段兩端連接特定的寡核苷酸接頭，隨后在高通量測序平臺上進行測序。

數(shù)據(jù)分析：包括序列比對，將測序讀段映射到參考基因組；峰值調(diào)用，識別蛋白質(zhì)結(jié)合的富集區(qū)域；功能注釋，分析峰的位置和功能等。 二代測序是一種能夠同時對數(shù)百萬甚至數(shù)十個億DNA片段進行測序的方法。蘇州嘉安健達二代測序公司

二代測序用于蛋白組測序面臨的挑戰(zhàn)

數(shù)據(jù)解讀復雜性：二代測序產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)量極其龐大，要從中準確挖掘出與蛋白組實際情況緊密相關(guān)的有效信息并不容易，需要運用復雜的生物信息學算法和工具進行數(shù)據(jù)分析、比對、注釋等操作，而且從轉(zhuǎn)錄組信息到準確推斷蛋白質(zhì)情況還存在諸多不確定因素，比如可變剪接、翻譯后調(diào)控等都會干擾解讀。

定量不準確問題：雖然能通過轉(zhuǎn)錄組測序推測蛋白表達量趨勢，但這種定量并非直接對蛋白質(zhì)本身的精確測定，與實際蛋白質(zhì)的真實含量存在偏差，而且不同樣本間、不同實驗批次間的轉(zhuǎn)錄組定量數(shù)據(jù)的穩(wěn)定性和可比性也有待進一步提升，難以像專門的蛋白定量技術(shù)那樣精細反映蛋白量的變化。 徐匯區(qū)嘉安健達二代測序應用二代測序是為了改進一代測序通量過低的問題而出現(xiàn)的。

二代測序——WES測序

WES測序即全外顯子組測序，是一種基于二代測序技術(shù)（NGS）的基因檢測方法。以下是其具體介紹：

技術(shù)流程

樣本準備：通常從組織或血液樣本中提取DNA，如EDTA-K2抗凝的外周靜脈血。

DNA打斷：使用超聲波或酶等方法將DNA片段化，以便后續(xù)操作。

末端修復：對DNA片段的末端進行修復，使其能夠順利進行后續(xù)的測序反應。

文庫制備：將DNA片段與測序接頭連接，構(gòu)建用于高通量測序的文庫。

測序：一般使用Illumina測序平臺對文庫進行高通量測序，可獲得大量的DNA序列信息。

數(shù)據(jù)分析：對測序得到的數(shù)據(jù)進行生物信息學分析，包括序列比對、變異鑒定等。

變異解釋：識別外顯子中的變異，如單核苷酸變異、插入或缺失等，并確定這些變異是否與遺傳病有關(guān)。

不同二代測序技術(shù)平臺的速度Illumina測序平臺：這是目前市場上應用較為***的二代測序平臺之一，其測序速度較快。例如IlluminaNovaSeq系列，一次運行可以在1-3天內(nèi)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù)，通量可達數(shù)億甚至數(shù)十億條讀長，能夠滿足大規(guī)?；蚪M學研究和臨床檢測的需求。Roche454測序平臺：Roche454測序系統(tǒng)的測序速度也較快，其特點是測序片段比較長，高質(zhì)量的讀長能達到400bp左右，一次運行可以在24小時左右完成對一定數(shù)量樣本的測序。BGISEQ系列：華大智造的BGISEQ系列測序儀在速度上也有出色表現(xiàn)，如全球二代測序速度**快設備E25量產(chǎn)，為快速測序提供了有力支持單細胞測序?qū)儆诙鷾y序嗎？

常見的二代測序類型②

靶向測序：聚焦于特定的基因或基因區(qū)域進行重點測序，如對已知與某種疾病相關(guān)的基因**測序，具有成本低、效率高、數(shù)據(jù)解析簡單等優(yōu)點，廣泛應用于疾病診斷、藥物靶點篩選和臨床個體化***等.

微生物基因組測序：用于檢測和分析環(huán)境、人體或其他樣本中的微生物群落的基因組組成，可了解微生物多樣性、功能及與宿主相互作用，在微生物生態(tài)學、傳染病診斷、環(huán)境科學等領(lǐng)域有重要應用.

甲基化測序：主要研究DNA甲基化修飾情況，對基因表達調(diào)控等有重要意義，通過檢測甲基化水平變化，可探究疾病發(fā)***展機制、尋找生物標志物及藥物靶點等. 二代測序?qū)嶒炁c測序原理是什么？江西哪里有二代測序運用

二代測序的優(yōu)勢是高靈敏度。蘇州嘉安健達二代測序公司

二代測序技術(shù)的一些研究進展②植物基因組學研究領(lǐng)域：花生四倍體野生種基因組測序：河南農(nóng)業(yè)大學殷冬梅教授團隊和上海交通大學韋朝春教授團隊聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組amon2.0版本。該研究結(jié)合ONT超長讀段、二代測序和Hi-C等多種測序技術(shù)，使基因組的連續(xù)性、完整性和準確性都得到了顯著提高，為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。長雄野生稻基因組解析：中科院昆明動物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機構(gòu)合作，利用二代測序技術(shù)成功組裝出高質(zhì)量的長雄野生稻基因組，并對其與近緣物種的分歧時間、基因的收縮擴張等進行了分析，還鑒定出一批可能影響地下莖以及自交不親和性狀的候選基因及代謝途徑，為解析相關(guān)分子機制提供了重要線索。蘇州嘉安健達二代測序公司