近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。ELISA試劑盒特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):包被抗體為山羊多抗。多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應(yīng)性。酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復(fù)合單位,可測得HBsAg變異樣品,提高檢測的特異性(99.98%)提高檢測的靈敏度,應(yīng)用Parl Ehrich 學(xué)說(PEI)HBsAg標(biāo)準(zhǔn)品,對ad標(biāo)準(zhǔn)品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標(biāo)準(zhǔn)品靈敏度為0.025ng/mlELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)。Elisa試劑盒避免用手接觸,有毒。清遠(yuǎn)ELISA試劑盒哪里能買
檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線較高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)R≥0.98。試劑盒重復(fù)性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準(zhǔn)確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復(fù)性。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。清遠(yuǎn)ELISA試劑盒哪里能買ELISA檢測操作步驟復(fù)雜,可能會影響測定結(jié)果的因素較多。
ELISA試劑盒的抗原抗體反響4℃更為完全,在放射免疫測定中多使反響在冰箱中過夜,以構(gòu)成*多的沉淀。但因所需時刻太長,在ELISA試劑盒中一般不予選用。 ELISA試劑盒 保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均選用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度敏捷平衡。為防止蒸騰,板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反響板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的資料如金屬等。
ELISA試劑盒操作要點一共有七大點,它們分別是:標(biāo)本的采取和保存、試劑的準(zhǔn)備、加樣、保溫、洗滌、顯色和比色、酶標(biāo)比色儀、結(jié)果判斷。作ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣闊,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA試劑盒檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA試劑盒測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。ELISA試劑盒得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇。
ELISA試劑盒的特點:1、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;5、節(jié)省實驗經(jīng)費。ELISA試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明方法的準(zhǔn)確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯標(biāo)準(zhǔn)樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。ELISA試劑盒吸附在固相載體表面時,要求純度要好。清遠(yuǎn)ELISA試劑盒哪里能買
ELISA試劑盒特點:高效、靈敏、特異的抗體;清遠(yuǎn)ELISA試劑盒哪里能買
目前應(yīng)用較多的免疫酶技術(shù)是酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA試劑盒),如果要分類的話,它屬于異相固相酶免疫技術(shù)。所謂異相是指在檢測時不需要將酶標(biāo)記抗原抗體和游離抗原抗體分開,所謂固相就是指的ELISA試劑盒的96孔板固相載體了。ELISA試劑盒的主要原理:1、包被:抗原或者抗體能以物理性吸附于固相載體表面,可能原理是蛋白質(zhì)和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原抗體反應(yīng)等免疫活性。2、標(biāo)記:抗原或者抗體可通過共價鍵與酶連接成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫活性和酶的催化特點。3、顯色:酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或者抗體結(jié)合后,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計算抗原或者抗體的相對含量。清遠(yuǎn)ELISA試劑盒哪里能買
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